Onkogenne Mutacje CSF3R w przewlekłej białaczce neutrofilowej i nietypowym CML AD 5

Nieinfekowane rodzicielskie komórki Ba / F3 i komórki Ba / F3 zakażone wektorem wolnym zastosowano jako kontrole. W okresie 10 dni obie klasy mutacji CSF3R były zdolne do transformacji komórek Ba / F3 do niezależnego wzrostu interleukiny-3, a proksymalne mutacje błony (T615A i T618I) transformowały komórki w tym teście znacznie szybciej niż mutanty skrócone ( Q741X i S783fs). Panel F pokazuje komórki Ba / F3 wyrażające mutacje CSF3R T618I lub S783fs przed lub po transformacji niezależnej od interleukiny-3 (IL3- wskazuje transformowane komórki). Lizaty komórkowe poddano analizie immunoblotów pod kątem CSF3R, TNK2, fosfo-STAT3 (pSTAT3), całkowitego STAT3, fosfo-JAK2 (pJAK2), całkowitego JAK2, fosfo-SRC (pSRC), całkowitego SRC i aktyny. Rodzicielskie komórki Ba / F3 lub komórki Ba / F3 eksprymujące dziki CSF3R typu dzikiego włączono jako kontrole. Znaleźliśmy wzbogacenie mutacji w CSF3R u 16 z 27 pacjentów (59%) z CNL lub atypowym CML (Tabela i Figura 1A oraz Tabela Zidentyfikowane warianty sekwencji obejmowały proksymalne mutacje błony (T615A i T618I) i wiele różnych mutacji ramki lub nonsensownych, które obcinają ogon cytoplazmatyczny CSF3R (D771fs, S783fs, Y752X i W791X). Podobne mutacje, które skracały domenę cytoplazmatyczną CSF3R opisano u pacjentów z wrodzoną neutropenią, która rozwija się w AML po długotrwałym leczeniu czynnikiem stymulującym kolonię granulocytów (G-CSF) .18-20 Reprezentatywne dane głębokiego sekwencjonowania i walidacja w sekwencjonowaniu Sangera dla pacjentów ze zmutowanym CSF3R pokazano na rys. S2 i S3 w dodatkowym dodatku. Pięciu pacjentów (pacjenci od 3 do 7) miało zarówno proksymalne i okrojone mutacje błonowe (tabela S3 w dodatkowym dodatku), a my potwierdziliśmy, że mutacje tego związku mogą wystąpić na tym samym allelu CSF3R bez wymaganego porządku dla sekwencyjnego pozyskiwania mutacji (Tabela
Zidentyfikowaliśmy mutację CSF3R u z 92 pacjentów z AML, a 2 z 200 pacjentów z AML w zestawie danych dotyczących raka genu nowotworowego AML miało mutację CSF3R, 21 wskazującą, że częstość występowania takich mutacji w AML jest niska (1%) ( Tabela 1). Zidentyfikowaliśmy proksymalną mutację błony CSF3R (T618I) u z 3 pacjentów z wczesną białaczką limfoblastyczną T-komórkową prekursorową limfocytu T (ETP-T-ALL) (Tabela i Fig. Nie znaleźliśmy żadnych dodatkowych mutacji CSF3R u 8 pacjentów z ALL z komórek T lub u 41 pacjentów z ALL z komórek B (Tabela 1). Na koniec zsekwencjonowaliśmy próbki od 3 pacjentów z reaktywną neutrofilią, a żadna z nich nie miała mutacji CSF3R. Podsumowując, dane te sugerują, że mutacje w CSF3R są defektami molekularnymi CNL i atypowej CML, a testowanie mutacji CSF3R może pomóc w diagnozowaniu tych chorób.
Uzależnienie od kinaz rodziny-TNK2 lub KWAS SRC
Następnie próbowaliśmy ustalić, czy próbki zawierające zmutowany CSF3R wykazują wrażliwość in vitro na małocząsteczkowe inhibitory kinaz lub siRNA skierowane przeciwko kinazom, które ulegają rozregulowaniu poniżej zmutowanego CSF3R.
[hasła pokrewne: dimenhydrynat, elektrostymulacja krtani, pimafucort maść ]